Características del diagnóstico prenatal por hibridación fluorescente in situ en Cuba / Features of the prenatal diagnosis by fluorescence in situ hybridization in Cuba

Introducción: El diagnóstico prenatal mediante la hibridación fluorescente in situ disminuye el tiempo de diagnóstico al no ser necesario el cultivo celular. Objetivo: Describir las características y experiencias del diagnóstico prenatal por hibridación fluorescente in situ en Cuba. Método: En amniocitos in situ se aplicaron sondas CEP y LSI para la detección de aneuploidías de los cromosomas 21,18,13, X y Y y sondas LSI para la detección de deleciones asociadas a síndromes de microdeleción. Resultados: Se remitieron al Centro Nacional de Genética Médica 629 casos de alto riesgo genético. Prevaleció la indicación de alteraciones fetales detectadas por ecografía. En 612 (97 por ciento) casos se obtuvo un diagnóstico satisfactorio, entre ellos, 50 (8,1 por ciento) casos positivos, con predominio del síndrome Down en 26 casos. Se corroboraron por citogenética convencional 312 casos con 98 por ciento de concordancia con los resultados obtenidos por hibridación fluorescente in situ. Se utilizó el líquido amniótico refrigerado para corroborar casos de diagnóstico dudoso obtenido por citogenética y se detectaron 3 fetos con mosaicos cromosómicos, el origen de un cromosoma marcador y la definición del sexo fetal en un caso. Conclusiones: Con la tecnología por hibridación fluorescente in situ el diagnóstico prenatal logra una segura opción de análisis en aquellos casos de embarazos de alto riesgo genético. Debido a limitaciones tecnológicas, la prueba por hibridación fluorescente in situ en células amnióticas en interfase, se ha adaptado a nuestras condiciones, para lograr siempre un diagnóstico seguro con el menor perjuicio posible a la embarazada, el feto y su familia(AU)

Introduction: Prenatal diagnosis by fluorescent in situ hybridization decreases the time of diagnosis not being necessary the cell culture. Objective: To describe the characteristics and experiences of prenatal diagnosis by fluorescent in situ hybridization in Cuba. Method: In in situ amniocytes CEP catheters were applied and LSI for the detection of aneuploidies of the 21,18,13, X and Y chromosomes, and LSI catheters for the detection of deletions associated with microdeletion syndromes. Results: 629 cases of high genetic risk were referred to the National Center of Medical Genetics. There was a prevalence of the indication of fetal abnormalities detected by ultrasound. In 612 (97 percent) cases the diagnosis was achieved in a satisfactory form, among them 50 (8.1 percent) positive cases, with predominance of Down syndrome in 26 cases. There were corroborated 312 cases by conventional cytogenetics with 98 percent of agreement with the results obtained by fluorescent in situ hybridization. It was used the cooled amniotic fluid to corroborate cases of uncertain diagnosis obtained by cytogenetics and there were detected 3 fetuses with chromosomal mosaics, the origin of a marker chromosome and the definition of fetal sex in one case. Conclusions: With the technology by fluorescent in situ hybridization, the prenatal diagnosis achieved a safe analysis option in cases of genetic high-risk pregnancies. Due to technological limitations, the test by fluorescent in situ hybridization in amniotic cells in interphase has adapted to the conditions in order to always achieve a safe diagnosis with the less possible damage to the pregnant women, the fetus and its family(AU)

Reordenamientos cromosómicos estructurales en el diagnóstico citogenético prenatal y postnatal acorde a su origen / Structural chromosomal rearrangements in prenatal and postnatal cytogenetic diagnosis according to their origin

Introducción: según el origen, existen diferentes tipos de reordenamientos cromosómicos estructurales tales como: heredados, de novo y desconocidos; en dependencia de esto será el riesgo en la descendencia y el asesoramiento genético específico a los pacientes y a sus familiares.Objetivo: describir los diferentes reordenamientos cromosómicos estructurales, detectados según su origen.Métodos: se utilizó la información necesaria contenida en los registros de los laboratorios de Citogenética de los Centros de Genética Médica Nacional y Provincial de La Habana. Se confeccionó una base de datos en Excel. Se identificaron 249 portadores de reordenamientos cromosómicos estructurales de 23 403 casos diagnosticados. Se identificó el origen de los mismos con datos de los registros, basados en la extensión de estudios citogenéticos indicados a padres o familiares que permitieran acreditarlo.Resultados: el origen de causa desconocida fue el de mayor frecuencia para 48,2 por ciento; predominaron en estudios postnatales con 82,5 por ciento. Las heredadas con un 43,0 por ciento, prevalecieron en estudios prenatales (58,0 por ciento); las de origen materno en el 56,0 por ciento. Las heredadas maternas fueron mayores en las inserciones, con valor de 100,0 por ciento, mientras que el origen paterno predominó en las inversiones con valores de 90,0 por ciento. Conclusiones: el origen de causa desconocida predominó en estudios postnatales, mientras que en los prenatales prevalecieron las de origen heredado. Las heredadas maternas fueron mayoritarias. Es necesario como una estrategia de prevención, incrementar la detección del origen de los RCE en los portadores, así como la extensión del estudio a los miembros de la familia de portadores

Pacientes con inserción cromosómica estudiados en el Centro Nacional de Genética Médica (2005 2013) / Patients with chromosome insertions studied at the National Center of Medical Genetics (2005 2013)

Las inserciones cromosómicas son rearreglos cromosómicos poco frecuentes que implican tres puntos de ruptura. Su incidencia para los estudios convencionales se estima en un caso cada 80 000, sin embargo se han detectado hasta uno en 500 casos empleando técnicas de citogenética molecular. Se describen los casos estudiados postnatalmente con hallazgo de inserción cromosómica entre los años 2005 y 2013 en el laboratorio de Citogenética. Durante el periodo mencionado se realizaron 8050 estudios citogenéticos por técnicas convencionales que incluyó el cultivo con linfocitos, la obtención de metafases y su tinción con bandas GTG estándar. Se identificaron cuatro casos con diagnóstico positivo de inserción cromosómica. Se corroboró la baja incidencia de esta aberración cromosómica en estudios convencionales y su presencia en pacientes sin una afectación fenotípica …(AU)

Diagnóstico prenatal en amniocitos sin cultivar: el FISH, un método rápido y eficaz / Prenatal diagnosis in amniocytes without culture: FISH, a rapid and safe method

La utilización de la técnica de hibridación in situ con fluorescencia aplicada al diagnóstico prenatal citogenético es una vía rápida para establecer un nexo entre los genes y los cromosomas sin necesidad de realizar cultivos celulares, permitiendo la detección de anomalías cromosómicas en células en interfase. El objetivo del presente trabajo fue evaluar los resultados obtenidos en la introducción de este método para el diagnóstico prenatal. Se diagnosticaron 104 casos de alto riesgo genético, predominando la indicación de alteraciones fetales detectadas por ecografía. Fueron diagnosticados 11 casos positivos, de los cuales 6 fueron síndromes Down, 2 fueron síndromes de Patau, un síndrome Edward, una polisomia del X y una deleción 22q11.2. En mitad de los casos positivos no se realizó estudio de corroboración por citogenética convencional por varias razones: primero por existir una correlación entre el hallazgo ecográfico y el diagnostico por FISH. Otra razón fue la avanzada edad gestacional con que se realizaron estos casos que no permitía el cultivo de amniocitos, y por último que en algunos de ellos fue imposible realizar una cordocentesis por la ubicación de la placenta. Se presentó un caso normal por FISH que nació con múltiples malformaciones y el análisis clínico del recién nacido sugiere una deleción del brazo corto del cromosoma 4. En conclusión la técnica FISH en células en interfase combinada con un correcto manejo de las indicaciones de riesgo genético y el cariotipo convencional, cuando sea posible, constituye una nueva estrategia para el diagnóstico prenatal en Cuba…(AU)

Aniversario 30 del diagnóstico prenatal citogenético en La Habana / 30th Anniversary of cytogenetic prenatal diagnosis in Havana

El diagnóstico prenatal citogenético (DPC) es una eficaz opción diagnóstica para el complemento cromosómico fetal. Este programa se inicia en la Habana, específicamente en el laboratorio de citogenética en el año 1983. Se han aplicado diferentes modalidades para el DPC como la amniocentesis, la biopsia de vellosidades coriónicas, la cordocentesis y el FISH. El objetivo del siguiente artículo es evaluar los resultados de estos años de trabajo en el laboratorio de citogenética del Centro Nacional de Genética Médica (CNGM) de la Habana. Se realizó un estudio retrospectivo descriptivo en los procedimientos del diagnóstico prenatal en el periodo 1983-2012. Fueron analizados 22 835 diagnósticos prenatales, de los cuales 20 565 correspondieron a cultivo de amniocitos (LA), 1785 correspondieron a muestras de vellosidades coriónicas (VC), 385 a cultivo de la sangre del cordón umbilical (SC) y 100 casos realizados en células en interfase aplicando la técnica FISH. En las muestras de LA y VC predominó la indicación de avanzada edad materna y el por ciento de positividad estuvo en un rango del 2-3(percent). En las pruebas de SC y FISH el por ciento de detección de cromosomopatías se incrementó hasta el 8-9(percent). Es necesario introducir los marcadores bioquímicos en el suero materno para aumentar el por ciento de cromosomopatias a detectar. El reporte mundial de defectos congénitos ubica a Cuba como uno de los países de más baja prevalencia del Síndrome Down y otras cromosomopatías, demostrando la efectividad y repercusión social del programa de diagnóstico prenatal…(AU)

Deleción del brazo largo del cromosoma 4(q34 qter). Reporte del hallazgo citogenético de un caso / Deletion of the long branch of the 4(q34 qter) chromosome. Report of cytogenetic finding in one case

El síndrome de deleción del cromosoma 4q presenta un amplio rango de manifestaciones clínicas en el fenotipo, con una incidencia estimada 1:100 000 y un índice de mortalidad del 28(percent). La severidad de las malformaciones varía ampliamente y depende del tamaño y la posición de la deleción en el cromosoma. El objetivo de este trabajo es describir el hallazgo citogenético de un niño de 11 años de edad con manifestaciones clínicas severas. La muestra proviene de la consulta de genética clínica del Hospital Juan Manuel Márquez. Se realizó el cariotipo en sangre periférica utilizando la micro técnica de cultivo de linfocitos y el bandeo GTG según técnicas estandarizadas en el laboratorio de citogenética del Centro Nacional de Genética Médica. Las 15 metafases analizadas mostraron un cariotipo masculino con una deleción terminal en el brazo largo del cromosoma 4 correspondiendo a la fórmula cromosómica 46, XY, del (4) (q34→qter) según el Sistema Internacional de Nomenclatura Citogenética 2013. El estudio citogenético resultó de especial interés para la detección de un síndrome cromosómico raro…(AU)

Aneuploidías y alteraciones estructurales en pacientes con enfermedades genéticas relacionadas con el cromosoma X / Aneuploidies and structural alterations in patients with X-chromosome-related genetic diseases

Las anomalías cromosómicas sexuales son las más frecuentes al nacimiento, se estima que tienen una incidencia de 1 en 300-400 embarazos. Individuos con aberraciones cromosómicas sexuales presentan un amplio espectro en el fenotipo dependiendo del tamaño de la región del cromosoma que está involucrada en la aberración, los genes localizados en el punto de ruptura y alrededor del mismo. Este trabajo tiene como objetivo describir el hallazgo citogenético en pacientes con enfermedades genéticas asociadas a los cromosomas sexuales. Se realizaron 300 estudios cromosómicos en el Laboratorio de Citogenética del Centro Nacional de Genética Médica utilizando la microtécnica de cultivo de linfocitos con suero exógeno y bandas GTG, según técnicas estandarizadas en el laboratorio. Del total de casos estudiados, 81 (27 (percent) involucraron los cromosomas sexuales; de estos, 56 (18,6 (percent) pacientes tenían aberraciones numéricas y 25 (8,33 (percent) aberraciones estructurales. La aneuploidía 45,X en línea pura constituyó el 15 (percent), y en mosaico un 3,6 (percent). Las deleciones constituyeron la anomalía estructural más frecuente del cromosoma X…(AU)

Frecuencias de reordenamientos cromosómicos estructurales acorde a las indicaciones para estudios citogenéticos prenatales y postnatales / Structural chromosomal reordering frequencies following the recommendations for prenatal and postnatal cytogenetic studies

Las aberraciones cromosómicas estructurales son de gran importancia por el riesgo que presentan los portadores de tener descendencia con reordenamientos desbalanceados; sin embargo, no han sido suficientemente estudiadas. Se describe la frecuencia de las aberraciones estructurales acorde al motivo de indicación por el cual fue remitido el caso al laboratorio. Se utilizó la información contenida en los registros de los laboratorios de Citogenética de los Centros de Genética Médica Nacional y Provincial de Ciudad de La Habana; los datos se recogieron manualmente en una base de datos en Excel. En 23,403 diagnósticos citogenéticos realizados (72,4 por ciento de estudios prenatales y 27,6 por ciento de estudios postnatales) se identificaron 249 aberraciones cromosómicas estructurales para una frecuencia del 1,1por ciento . La mayoría se presentó en los estudios postnatales (59,4 por ciento ). Las mayores frecuencias de aberraciones estructurales se detectaron en los casos con el motivo de indicación familiares de portadores (48,6 por ciento) y padre portador de reordenamiento cromosómico estructural (40,0 por ciento ); mientras que la indicación trastornos reproductivos (0,8 por ciento ), fue menor a las reportadas por la literatura. Las indicaciones de estudios citogenéticos prenatales de padre portador de reordenamiento cromosómico estructural y de hallazgos ultrasonográficos con malformaciones congénitas asociadas a cromosomopatía tuvieron las mayores frecuencias de detección de anomalías cromosómicas estructurales desbalanceadas(AU)

Structural chromosomal aberrations are of great importance due to the risk for carriers to have offspring with unbalanced reordering and nevertheless, they have not been studied in depth. In this paper the frequency of structural aberrations is described following the indication of why the case was sent to the laboratory. The source of information was the data from the registers from Cytogenetics Laboratories of the National Medical Genetics Center and the corresponding provincial one in Havana City and data were acquired manually from an Excel database. From the 23,403 cytogenetic diagnoses carried out (72,4,percent for prenatal studies and 27,6 percent for postnatal studies) 249 aberrations were identified for a frequency value equal to 1,1 percent, the majority of them diagnosed in postnatal studies (59,4 percent). The largest frequencies of structural aberrations were detected in the cases of carriers relatives (48,6 percent) and father carrier of structural chromosomal reordering (40,0 percent); while in the case of reproductive disorders (0,8 percent ), they were less than the values reported in the literature. The indications of prenatal cytogenetic studies for the case of a father, carrier of structural chromosomal reordering and the case of ultrasonographic findings with congenital malformations associated to chromosomopathy showed the highest frequencies of structural unbalanced chromosomal anomalies(AU)

Diagnóstico Prenatal Citogenético en Camagüey. Resultados de 20 años / Cytogenetic Prenatal Diagnosis in Camagüey. Results of 20 years of work

Se realizó un estudio descriptivo transversal donde se recogen los resultados del diagnóstico prenatal citogenético a partir de líquido amniótico del Laboratorio de Citogenética del Centro Provincial de Genética Médica de Camagüey, en un período de 21 años (1986-2007). Los cromosomas se obtuvieron primero, siguiendo el Manual de Laboratorios de Citogenética y desde 1995 según el procedimiento seguido por Ram S. Verma y Harbin Babu. Se realizó bandeo cromosómico GTG y se analizaron entre 10 y 15 metafases en cada caso. En el período estudiado se procesaron 1 945 casos, y se detectaron 75 anomalías cromosómicas. El 84,22(percent)de los casos estudiados fueron mujeres de más de 37 años. El orden de frecuencia de las anomalías cromosómicas entre los casos positivos fue: aberraciones numéricas (56(percent), aberraciones estructurales (32(percent) y mosaicos (12(percent). La anomalía cromosómica más frecuente fue el Síndrome Down con un 42,66(percent) del total de aberraciones detectadas…(AU)

Diagnóstico prenatal de la mucopolisacaridosis (MPS) I Hurler a partir de un estudio familiar / Prenatal diagnosis of mucopolysacchraridosis (MPS) I Hurler a family studies

Las mucopolisacaridosis (MPS) se corresponden con un grupo heterogéneo de desórdenes lisosomales, debido a deficiencia de enzimas que degradan mucopolisacáridos, estas estructuras, no degradadas completamente, se acumulan en el interior de las células, alterando tejidos y órganos específicos, con efectos pleiotrópicos, en correspondencia con la vía de degradación dañada. El retardo mental profundo es una consecuencia que se presenta en algunas de estas enfermedades tipos. Se realizó el estudio bioquímico de una niña y sus padres, con características clínicas de MPS I y el diagnóstico prenatal en un nuevo embarazo de la misma pareja. El examen en los padres y la niña enferma se realizó en leucocitos, usando el método fluorimétrico descrito por Stirling, J en 1979. El diagnóstico prenatal fue realizado en amniocitos cultivados, en los cuales se midió la actividad enzimática de la α-L-Iduronidasa utilizando el método de Stirling, J y col. 1978. En ambos casos se tomaron como referencia de comparación los resultados obtenidos en los controles, leucocitos de una persona sana para los padres y la niña y amniocitos de una gestante de la misma edad gestacional, para el feto. Al medir la enzima α-L-Iduronidasa, se obtuvo una actividad de 5,3(percent) en la niña afectada (0,11ηM/mg/prot/hora), 46.6(percent) en la madre (2,23ηM/mg/prot/hora), y 50,18percent) en el padre (2,32 ηM/mg/prot/hora), encontrando en el control un 100(percent) de actividad (4,75ηM/mg/prot/hora). En el feto se obtuvieron valores correspondientes con un feto varón sano, 65,5(percent) (4,16ηM/mg/prot/hora) con respecto al feto tomado como control normal (100percent) (6,35ηM/mg/prot/hora). El estudio realizado permitió identificar al feto como normal o portador...(AU)

Estudios citogenético en muestras de sangre fetal obtenida mediante cordocentesis. Primer reporte / Cytogenetic studies using fetal blood samples from umbilical cord. First report

El propósito de este trabajo es analizar los resultados de los estudios prenatales citogenéticos realizados a partir de mues-tras de sangre de cordón umbilical, en el periodo de Enero del 2002 a Diciembre del 2006, en el que se realizaron 106cordocentesis por indicación de cariotipos fetales. La obtención de cromosomas se efectuó a partir de linfocitos de sangre fetal estimulados durante 48 horas. En el análisis citogenético, se contaron como promedio 18 metafases en bandas GTG y para la confección del cariotipo se empleó el procesador de imágenes Metasystem-Ikaros. Del total de casos, la obtención de cariotipo fue posible en el 83,0(percent)(88/106) y se detectaron anomalías cromosómicas en el 5,7(per cent) (5/88) de las pacientes. El 81,8 (percent)del total de casos estudiados tenían una edad gestacional entre 21-26 semanas. El 46,6(percent) de los mismos correspondió a embarazadas en las edades comprendidas entre 36-40 años de edad. El método empleado permitió detectar anomalías cromosómicas en embarazos de alto riesgo a edades gestacionales que sobrepasan el tiempo del diagnóstico prenatal citogenético por líquido amniótico, contando así, con otra técnica para el estudio prenatal citogenético de la población de riesgo, lo cual contribuyó a la disminución de la mortalidad infantil y al bienestar genético de la familia…(AU)

Mosaicismo de aberraciones estructurales, incidencia y repercusión prenatal / Structural aberration mosaicism, incidence and prenatal repercussion

Se determinó la frecuencia de aparición del mosaicismo de aberracionesestructurales, en un muestreo de 10 676 casos de diagnóstico prenatalcitogenético, estableciéndose una correlación cariotipo fenotipo enlos casos hallados. Usando los criterios de Bui, se hizo una clasificaciónde los que constituían un mosaico cromosómico y de ellos, los quepresentaban aberraciones cromosómicas estructurales. Los casos los siguieron médicos y enfermeras especialistas en genética. Seencontraron 5 casos con mosaicos de aberraciones estructurales para0,04(percent), 4 son confirmados por el seguimiento citogenético, de loscuales 3 presentaban anomalías detectadas por ultrasonido. Un casono resultó confirmado citogenéticamente después del aborto, presentóun feto en apariencia normal. Elmosaicismo de aberracionesestructurales es un evento raro que debe ser controlado en el diagnósticoprenatal citogenético, y confirmarse por el porcentaje de apariciónde la línea aberrada, los posibles hallazgos ultrasonográficos y eldiagnóstico prenatal por punción del cordón umbilical…(AU)